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格格Caroline新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
蛋白質(zhì)很純，但不長(zhǎng)晶體
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小妹剛剛學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)結(jié)晶，有很多不會(huì)的地方。 我做的蛋白350個(gè)aa，很純了，點(diǎn)晶體就是不長(zhǎng)，不是直接沉淀了就是透明的，預(yù)測(cè)了沒(méi)有什么信號(hào)肽之類(lèi)的，求助�。。。。。。�！就是不長(zhǎng)~�。。�！我應(yīng)該在哪些方面在進(jìn)行改進(jìn)呢�。�！謝謝謝謝！ |
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 蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)技術(shù) | 【分子生物】EPI帖 |
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BioChemCom
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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格格Caroline: 回帖置頂 2012-02-15 20:26:04
西瓜(金幣+3): Good！ 2012-02-15 22:21:27
西瓜(金幣+3): Good！ 2012-02-15 22:21:27
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這個(gè)方面的問(wèn)題，其實(shí)挺復(fù)雜的，你給出的哦信息也不夠明確。我覺(jué)得有幾件事情需要考慮。 1. 你的蛋白構(gòu)建是不是夠好，兩端的無(wú)規(guī)則序列是否刪除了？ 2. 就算兩端都刪除了，還是要做一系列的截?cái)鄻?gòu)建，用于探索可能的穩(wěn)定表達(dá)的結(jié)構(gòu)域。這些可以通過(guò)已有的晶體結(jié)構(gòu)、生物信息學(xué)相關(guān)的分析軟件來(lái)獲得信息。 3. 純化過(guò)程，也有一些問(wèn)題要考慮，溫度、Ni-NTA，分子篩和離子柱。 希望有更詳細(xì)的信息。 |
3樓2012-02-15 17:16:51
2樓2012-02-15 17:12:29
4樓2012-02-15 20:02:05
格格Caroline
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