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[交流]
overlap PCR之問題
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| 各位，我最近在連基因A（700bp左右）和基因B（700bp左右），重疊的連個(gè)引物為48bp，連個(gè)基因各占24bp。當(dāng)做重疊PCR時(shí)，在1400bp處有條帶（在我用的marker-D 1000bp和2000bp間的條帶）當(dāng)然也有其他的雜帶。我將此1400bp的帶回收后，以此為模板，用頭尾引物擴(kuò)增，每次都是1400bp處條帶很暗，而在700bp處條帶很亮。我用回收的1400bp做模板時(shí)，分別擴(kuò)基因A和基因B卻又能擴(kuò)出來很明顯的A和B，這不是證明了我回收的1400bp為連接上的基因嗎 ，可為什么用頭尾引物擴(kuò)1400本身卻擴(kuò)不出來呢？ |
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imyting
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西瓜
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