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[交流]
western-blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果，大家?guī)兔Ψ治鱿? 已有4人參與
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我最近在做一個(gè)關(guān)于純化抗體的課題，抗原E-coli表達(dá)后，自己純化的 ，跑膠的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)比較純，只有一條目的蛋白的主帶。然后免疫小鼠 篩選雜交瘤細(xì)胞，抗體純化后，用western檢測(cè)抗體的純度，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖，上樣孔分別是：Maker（自己做的，沒預(yù)染，所以看不到）；陰性對(duì)照，Ecoli（1:10稀釋）空菌；陰性對(duì)照，Ecoli（1:100稀釋）裂解液；目的蛋白（1:10）稀釋；目的蛋白（1:100）稀釋；目的蛋白（1:500）稀釋。目的大小23KD。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果，陰性對(duì)照孔兩個(gè)基本上沒有顏色，可以斷定我們的抗體和細(xì)菌蛋白是沒有交叉反應(yīng)的；目的蛋白均能染出顏色，但令人糾結(jié)的是，為什么1:10稀釋的目的蛋白（顏色最亮的那條）上方會(huì)多出一條帶（對(duì)了一下maker，大約50左右）？ 這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否能說明，我得到的抗體是純的？求大神指點(diǎn) [ Last edited by 迷情八月 on 2012-3-17 at 14:27 ] |
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3樓2012-03-17 15:46:02
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