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山水506銅蟲 (初入文壇)
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western blot 出不來結(jié)果！��！
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各位達(dá)人，我剛開始做western，不過也做過好多次了，每一次要么是什么都沒有，要么是有若隱若現(xiàn)的條帶，結(jié)果總是不好。請問是怎么回事��？ PS：用考馬斯亮藍(lán)染色，發(fā)現(xiàn)膠上基本沒有蛋白了，可在曝光后用麗春紅染膜后沒有發(fā)現(xiàn)蛋白條帶，但在網(wǎng)上查，說有的沒染出來也能做出來�。� 謝謝各位了~~  |
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Western是要比考染敏感，肉眼看不到的條帶也wetstern可出條帶。我覺得樓主的問題可以進(jìn)行以下嘗試： 1.可以同時跑兩塊一樣的膠，一塊直接考染，一塊轉(zhuǎn)膜后考染，進(jìn)行一下對比； 2.買個預(yù)染蛋白Marker一起跑、轉(zhuǎn),這樣轉(zhuǎn)沒轉(zhuǎn)過去，一目了然，國產(chǎn)的預(yù)染Marker也不貴； 3.膠上蛋白沒了，麗春紅膜上沒染出來，是不是轉(zhuǎn)過了，直接到膜底下的濾紙上去了，用PVDF膜要好些。 以上僅供參考，祝實(shí)驗(yàn)順利，呵呵。 |
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