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[求助]
western blot 出不來結果！��！
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各位達人，我剛開始做western，不過也做過好多次了，每一次要么是什么都沒有，要么是有若隱若現的條帶，結果總是不好。請問是怎么回事��？ PS：用考馬斯亮藍染色，發(fā)現膠上基本沒有蛋白了，可在曝光后用麗春紅染膜后沒有發(fā)現蛋白條帶，但在網上查，說有的沒染出來也能做出來��！ 謝謝各位了~~  |
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送鮮花一朵 
7樓2012-11-07 21:20:56
wenzonglu
木蟲 (正式寫手)
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2樓2012-11-03 14:23:16
wsgcc
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【答案】應助回帖
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感謝參與，應助指數 +1
yqbter: 金幣+1, 鼓勵發(fā)高質量帖 2012-11-03 17:19:29
山水506: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝了 2012-11-07 21:21:42
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Western是要比考染敏感，肉眼看不到的條帶也wetstern可出條帶。我覺得樓主的問題可以進行以下嘗試： 1.可以同時跑兩塊一樣的膠，一塊直接考染，一塊轉膜后考染，進行一下對比； 2.買個預染蛋白Marker一起跑、轉,這樣轉沒轉過去，一目了然，國產的預染Marker也不貴； 3.膠上蛋白沒了，麗春紅膜上沒染出來，是不是轉過了，直接到膜底下的濾紙上去了，用PVDF膜要好些。 以上僅供參考，祝實驗順利，呵呵。 |
3樓2012-11-03 14:48:02
4樓2012-11-03 15:03:21
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