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[求助]
western blot 出不來結果。!
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各位達人,我剛開始做western,不過也做過好多次了,每一次要么是什么都沒有,要么是有若隱若現(xiàn)的條帶,結果總是不好。請問是怎么回事? PS:用考馬斯亮藍染色,發(fā)現(xiàn)膠上基本沒有蛋白了,可在曝光后用麗春紅染膜后沒有發(fā)現(xiàn)蛋白條帶,但在網(wǎng)上查,說有的沒染出來也能做出來啊! 謝謝各位了~~ |
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (正式寫手)
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Western是要比考染敏感,肉眼看不到的條帶也wetstern可出條帶。我覺得樓主的問題可以進行以下嘗試: 1.可以同時跑兩塊一樣的膠,一塊直接考染,一塊轉膜后考染,進行一下對比; 2.買個預染蛋白Marker一起跑、轉,這樣轉沒轉過去,一目了然,國產(chǎn)的預染Marker也不貴; 3.膠上蛋白沒了,麗春紅膜上沒染出來,是不是轉過了,直接到膜底下的濾紙上去了,用PVDF膜要好些。 以上僅供參考,祝實驗順利,呵呵。 |
銀蟲 (正式寫手)
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