 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3807 | 回復(fù): 12 | |||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點擊這里進行查看 | |||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||||
dfhfzyl鐵蟲 (小有名氣)
|
[求助]
大片段PCR(2.1K)擴增求助
|
||||
|
我要擴增一個片段為2100bp的cDNA 我的目的基因是來自柑橘的基因,柑橘基因組已經(jīng)發(fā)布了. 設(shè)計引物時,直接選基因cds全長的頭尾14-22bp, 正反引物的GC比例盡量保持一致了. 我的擴增條件是: 模板2ul (模板濃度約為500ng) 正反引物為0.2ul buffer 2ul dNTP 2ul Mgcl2 1.2ul Taq酶 0.2 (我?guī)熜纸ㄗh我在真正擴增時需選擇高保真酶如pfu) ddH2O2調(diào)到20ul體系 PCR條件 94度4min 94度30秒 55度30秒 72度2:10分 30個循環(huán) 72度10分 4度半小時 按照以上的程序,我對6個目的基因(大小在都在2kB左右)擴增了好幾次都沒有明顯的帶出來或者帶很弱,而有一個基因出現(xiàn)了三條非常弱的帶? 求助高手!!! |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 核酸生物學(xué)實驗經(jīng)驗 | 【分子生物】EPI帖 | 代謝毒理細胞生物 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有284人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 求助：PCR擴增片段測序結(jié)果引物中間多出150bp的片段
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 大片段PCR擴增求助
已經(jīng)有34人回復(fù)
- 求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 求助 土壤基因組 PCR 擴增問題
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 真菌ITS序列PCR擴增 求助
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助！PCR擴增不出全長DNA序列怎么辦？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】土壤DNA提取及PCR
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光PCR擴增曲線問題
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】為什么PCR擴增產(chǎn)物片段長度比設(shè)計時的要長很多？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】請教PCR條件優(yōu)化
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR擴增后沒有條帶是怎么回事?
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】大片段連接轉(zhuǎn)化成功與否問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】重組質(zhì)粒PCR的taq酶選擇！
已經(jīng)有11人回復(fù)
3樓2012-04-26 17:22:10
2樓2012-04-25 13:20:37
ixido
木蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 33 (小學(xué)生)
- 金幣: 2066.4
- 紅花: 6
- 帖子: 206
- 在線: 70.4小時
- 蟲號: 998373
- 注冊: 2010-04-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
4樓2012-04-26 18:27:19
天使托
專家顧問 (職業(yè)作家)
T.Shen
-
專家經(jīng)驗: +57 - MolEPI: 106
- 應(yīng)助: 95 (初中生)
- 貴賓: 0.263
- 金幣: 16332.8
- 散金: 593
- 紅花: 74
- 沙發(fā): 9
- 帖子: 3652
- 在線: 289小時
- 蟲號: 441757
- 注冊: 2007-10-27
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
- 管轄: 微生物
5樓2012-04-26 18:49:28
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +8 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +6 | 金恩貝 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 354求調(diào)劑 +7 | Tyoumou 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 廣西大學(xué)材料導(dǎo)師推薦 +3 | 夏夏夏小正 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +5 | rmc8866 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +9 | 簡單點0 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 白QF 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 二本跨考鄭大材料306英一數(shù)二 +3 | z1z2z3879 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料 336 求調(diào)劑 +3 | An@. 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，080502，354分求調(diào)劑 +5 | 守候夕陽CF 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，求調(diào)劑 +5 | 材化逐夢人 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +16 | 于海海海海 2026-03-19 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +4 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南理工085701環(huán)境302求調(diào)劑院校 +3 | 葵梓衛(wèi)隊 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工求調(diào)劑 +6 | 緒幸與子 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|