 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門版塊排行榜 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3345 | 回復(fù): 19 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
liyouran85金蟲 (小有名氣)
|
[求助]
畢赤酵母表達(dá)問題求教
|
|||
| 使用載體pPIC9K整合表達(dá)，基因來(lái)源于細(xì)菌，根據(jù)序列預(yù)測(cè)的分子量為100 kDa左右，可是表達(dá)出來(lái)的蛋白大小在70 kDa左右，且不具備酶活，請(qǐng)問有可能哪些地方出現(xiàn)了問題？謝謝 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 酵母表達(dá)純化一站式解決！ | 蛋白表達(dá)純化鑒定精華 |
» 猜你喜歡
291求調(diào)劑
已經(jīng)有25人回復(fù)
-
一志愿北京科技大學(xué)085601材料工程英一數(shù)二初試總分335求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿北京科技，085601總分305求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
化學(xué)工程專碩324分，一志愿中國(guó)礦業(yè)大學(xué)求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
279求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
26年申博
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料工程322分
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
318求調(diào)劑，計(jì)算材料方向
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
292分，材料與化工，申請(qǐng)調(diào)劑
已經(jīng)有20人回復(fù)
-
085600 295分求調(diào)劑
已經(jīng)有18人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 如何提高畢赤酵母的表達(dá)量
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 畢赤酵母ppic9k表達(dá)原理問題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 求助畢赤酵母轉(zhuǎn)化問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 請(qǐng)教關(guān)于畢赤酵母搖瓶發(fā)酵的問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 有關(guān)畢赤酵母表達(dá)
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 畢赤酵母表達(dá)時(shí)的雜蛋白問題
已經(jīng)有16人回復(fù)
- smd1168畢赤酵母轉(zhuǎn)化問題
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 畢赤酵母表達(dá)問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 外源蛋白在畢赤酵母中不表達(dá)
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 畢赤酵母表達(dá)蛋白純化
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 畢赤酵母表達(dá)培養(yǎng)基
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 目的基因在畢赤酵母中的表達(dá)
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 畢赤酵母表達(dá)一直不表達(dá)
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 關(guān)于畢赤酵母表達(dá)載體
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 真題求教�。�！
已經(jīng)有10人回復(fù)
- Invitrogen 公司關(guān)于畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)的說(shuō)明書
已經(jīng)有205人回復(fù)
- 畢赤酵母發(fā)酵上清液——脫色素？？
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 【求助】藥典中規(guī)定純化水硝酸鹽的檢測(cè)方法出現(xiàn)問題了？？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】畢赤酵母表達(dá)用培養(yǎng)基BMGY BMMY的詳細(xì)配制方法，請(qǐng)賜教。
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于畢赤酵母電轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助/交流】推薦釀酒酵母、畢赤酵母胞內(nèi)表達(dá)質(zhì)粒
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 急！畢赤酵母表達(dá)問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
liyouran85
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 690.9
- 紅花: 3
- 帖子: 155
- 在線: 127小時(shí)
- 蟲號(hào): 487083
- 注冊(cè): 2007-12-28
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
5樓2012-05-03 16:06:39
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
liyouran85: 金幣+50, ★有幫助, 5 2012-05-03 15:37:43
silicare: 金幣-45, 樓主操作失誤，補(bǔ)償5個(gè)金幣 2012-05-03 15:44:45
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
liyouran85: 金幣+50, ★有幫助, 5 2012-05-03 15:37:43
silicare: 金幣-45, 樓主操作失誤，補(bǔ)償5個(gè)金幣 2012-05-03 15:44:45
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2012-05-02 23:17:49
post_ngao
木蟲 (正式寫手)
科研宅
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 14 (小學(xué)生)
- 金幣: 6362.9
- 紅花: 1
- 帖子: 320
- 在線: 61.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1692067
- 注冊(cè): 2012-03-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物無(wú)機(jī)化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
silicare: 金幣+50, BioEPI+1, 樓主獎(jiǎng)勵(lì) 2012-05-03 15:43:32
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
silicare: 金幣+50, BioEPI+1, 樓主獎(jiǎng)勵(lì) 2012-05-03 15:43:32
|
第一，細(xì)菌來(lái)源的蛋白為什么要用酵母表達(dá)？原核蛋白用E coli就可以了啊。 第二，就算你要用畢赤酵母表達(dá)，那么你的原核來(lái)源基因是否經(jīng)過優(yōu)化？因?yàn)楫叧嘟湍钢惺谴嬖诜峭ㄓ妹艽a子的。 第三，分子量變小，第一時(shí)間必須果斷測(cè)序，仔細(xì)檢查是否存在移碼突變、點(diǎn)突變等的問題，還必須考慮非通用密碼子的問題。 第四，沒有酶活力，除了序列的問題，我個(gè)人感覺還有使用畢赤酵母的原因。因?yàn)橛媒湍缸疃嗟木褪窃诶盟奶腔芰�，而畢赤酵母的過糖基化是出了名的，并且N、O糖基化位點(diǎn)很難預(yù)測(cè)。你的蛋白是原核來(lái)源的，它在行使催化功能的時(shí)候是不需要糖基化的，如果給它強(qiáng)加入糖基化非常有可能堵住底物通道或者使得cap有位阻打不開，就屬于多此一舉了。 第五，同一個(gè)蛋白序列，用E coli和酵母分別表達(dá)時(shí)，其最終的折疊狀態(tài)也是不同的，這也可能是沒有活力的原因之一。 所知信息不多，只能大致說(shuō)說(shuō)，具體情況還得具體分析。有需要可以聯(lián)系我。 |
3樓2012-05-03 10:16:36
liyouran85
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 690.9
- 紅花: 3
- 帖子: 155
- 在線: 127小時(shí)
- 蟲號(hào): 487083
- 注冊(cè): 2007-12-28
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
4樓2012-05-03 16:05:09
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +3 | 學(xué)而思兮知 2026-04-01 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +14 | 一樣YWY 2026-04-01 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 324分 085600材料與化工 +17 | 呆鵝oor 2026-03-27 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +5 | 好好讀書。 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿211，335分，0856，求調(diào)劑院校和導(dǎo)師 +11 | 傾____蕭 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +7 | 月月鳥木 2026-04-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師范361分，化學(xué)求調(diào)劑 +4 | Nicole88888 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 初試301，代碼085701環(huán)境工程，本碩一致，四六級(jí)已過，有二區(qū)一作，共發(fā)表5篇論文 +3 | axibli 2026-04-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 物理學(xué)調(diào)劑
+4
|
小羊36 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 英一數(shù)一總分334求調(diào)劑 +4 | 陳陽(yáng)坤 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | 11ggg 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求院校招收 +7 | 鶴鯨鴿 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +6 | 賣個(gè)關(guān)子吧 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 22408 359分調(diào)劑 +4 | Qshers 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600 286分 材料求調(diào)劑 +11 | 麻辣魷魚 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +17 | 田洪有 2026-03-26 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +8 | 嗯滴的基本都 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085602 化工專碩 338分 求調(diào)劑 +12 | 路癡小琪 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | jhx777 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 272求調(diào)劑 +7 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 7/350 |
|