 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3015 | 回復(fù): 10 | |||
夢中江樓新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
畢赤酵母表達蛋白純化
|
||
| 本人剛開始做實驗，畢赤酵母用甲醇誘導(dǎo)表達的蛋白在培養(yǎng)基中，應(yīng)該怎樣提純，蛋白加了His-tag標簽，用鎳和層析怎樣處理培養(yǎng)基？求鎳和層析的具體純化步驟。 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 分子生化實驗經(jīng)驗積累 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有125人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 生物材料相關(guān)板塊一周EPI總集以及生材應(yīng)助榜
已經(jīng)有97人回復(fù)
- 畢赤酵母表達一直不表達
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 組氨酸標簽的問題
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 人血清白蛋白溶液顏色問題
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 帶HIS標簽的可溶蛋白的純化問題
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 95KD蛋白純化求助！�。。。。。。�
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 畢赤酵母表達問題求教
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 牛血清白蛋白溶于水為什么是棕黃色的？
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 如何在蛋白純化后去除6組氨酸(6His)標簽
已經(jīng)有17人回復(fù)
- gst標簽蛋白的表達和純化
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 畢赤酵母表達出蛋白但沒有活性
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 畢赤酵母表達的蛋白無活性
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 畢赤酵母發(fā)酵上清液——脫色素？？
已經(jīng)有23人回復(fù)
- his標簽蛋白純化，不掛柱
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】用畢赤酵母表達載體pPIC9K表達蛋白時分子量的估計？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】畢赤酵母表達蛋白的奇怪現(xiàn)象
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
lifuzhu3838
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 12 (小學生)
- 金幣: 1186.8
- 帖子: 73
- 在線: 49小時
- 蟲號: 1472777
- 注冊: 2011-11-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 臨床免疫學檢驗
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
夢中江樓(gyesang代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖應(yīng)助！ 2013-07-23 11:38:47
夢中江樓: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-07-25 08:48:46
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
夢中江樓(gyesang代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖應(yīng)助！ 2013-07-23 11:38:47
夢中江樓: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-07-25 08:48:46
這個做過 。直接離心去掉菌體，收集上清。鎳柱處理好，用20mMTris、20mM磷酸二氫鈉‘2水、50mM咪唑、500mM氯化鈉，pH7.4做平衡液。咪唑可以看掛柱的效果調(diào)節(jié)量，氯化鈉就是看后面的柱子調(diào)節(jié)了，如果不怕麻煩透析，就這么加吧。洗脫最開始還是要多設(shè)計幾個咪唑梯度摸索一下的。樓上兩位蟲友的意見我都不是很贊同，分泌表達，肯定不用破碎的。過親和柱沒必要超濾的，除非體積特別大，上樣要非常久（10h），太累。條件摸好，親和柱一洗脫就把目的蛋白濃縮了。 |
5樓2013-07-23 09:03:39
lwiaanngg
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 46 (小學生)
- 貴賓: 0.773
- 金幣: 7403.2
- 散金: 24
- 紅花: 12
- 帖子: 1211
- 在線: 110.3小時
- 蟲號: 43541
- 注冊: 2004-04-10
- 專業(yè): 應(yīng)用高分子化學與物理
2樓2013-07-22 20:51:43
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
- 貴賓: 0.238
- 金幣: 17138.7
- 紅花: 43
- 帖子: 2251
- 在線: 712.4小時
- 蟲號: 111074
- 注冊: 2005-11-20
- 專業(yè): 生物化學
3樓2013-07-23 07:54:56
夢中江樓
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 173.5
- 帖子: 10
- 在線: 4.9小時
- 蟲號: 2506060
- 注冊: 2013-06-13
- 專業(yè): 放射醫(yī)學
4樓2013-07-23 08:56:38
夢中江樓
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 173.5
- 帖子: 10
- 在線: 4.9小時
- 蟲號: 2506060
- 注冊: 2013-06-13
- 專業(yè): 放射醫(yī)學
6樓2013-07-23 09:19:05
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
- 貴賓: 0.238
- 金幣: 17138.7
- 紅花: 43
- 帖子: 2251
- 在線: 712.4小時
- 蟲號: 111074
- 注冊: 2005-11-20
- 專業(yè): 生物化學
7樓2013-07-23 09:30:51
lifuzhu3838
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 12 (小學生)
- 金幣: 1186.8
- 帖子: 73
- 在線: 49小時
- 蟲號: 1472777
- 注冊: 2011-11-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 臨床免疫學檢驗
8樓2013-07-23 15:55:16
田曉會
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 24
- 散金: 15
- 帖子: 25
- 在線: 19.6小時
- 蟲號: 2124157
- 注冊: 2012-11-13
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學
9樓2014-05-12 20:11:31
匿名
用戶注銷 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1750.2
- 散金: 45
- 帖子: 178
- 在線: 205.3小時
- 蟲號: 0
- 注冊: 2013-01-18
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)寄生蟲學
10樓2014-10-27 16:20:13
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 夢中江樓 的主題更新
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | 小材化本科 2026-03-18 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +5 | S.H1 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +10 | z1z2z3879 2026-03-16 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +10 | 呼呼呼。。。。 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +11 | zjl的號 2026-03-16 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 277調(diào)劑 +5 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學 生命科學與健康學院-課題組招收2026級食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工求調(diào)劑 +5 | 緒幸與子 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩274一志愿211求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[基金申請]
今年的國基金是打分制嗎？
 50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | ahbd 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求老師收留調(diào)劑 +4 | jiang姜66 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856專碩279求調(diào)劑 +5 | 加油加油！? 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +4 | 威化餅07 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | ?醬給調(diào)劑跪了 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +6 | 邱gl 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] ［0860］321分求調(diào)劑，ab區(qū)皆可 +4 | 寶貴熱 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | 芬達46 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿]
投稿問題
5+4
|
星光燦爛xt 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0817化學工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|