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ljapril新蟲 (初入文壇)
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[求助]
提取動物組織RNA時的處理
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我要從小鼠腦部的海馬提取RNA，現(xiàn)在組織已經(jīng)有了，放在1.5ml的EP管中，只有一點(diǎn)點(diǎn)，提取RNA時需要充分研磨破碎，我們這里只有細(xì)胞超生破碎儀，那么我這種情況可以用嗎? 一是超生破碎放熱，會影響RNA嗎？ 二是探頭該怎么處理啊？用DEPC水沖洗？會不會很容易污染樣品？ 三是大概要破碎多久呢？設(shè)定的參數(shù)最好是多少��？怎么判斷破碎充分了呢？ 問題有點(diǎn)多，謝謝大家了！ |
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karin
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7樓2012-05-17 15:05:46
【答案】應(yīng)助回帖
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裂解細(xì)胞膜不是靠吹打，是靠化學(xué)試劑（Trizol里的酚）。吹打只是把大團(tuán)組織塊吹散以便裂解。所以大可不必?fù)?dān)心。 另外，那么少的組織如果用研磨損失的估計比剩余的還多。 另外axygen有一種叫做研磨棒的東西，與進(jìn)口1.5ml離心管配合使用也可進(jìn)行“研磨”操作。個人經(jīng)驗如果是易散易吹打的組織（如腦）還不如直接吹打。 |
8樓2012-05-17 15:49:15
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10樓2012-05-23 23:54:38
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