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ljapril新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
提取動(dòng)物組織RNA時(shí)的處理
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我要從小鼠腦部的海馬提取RNA，現(xiàn)在組織已經(jīng)有了，放在1.5ml的EP管中，只有一點(diǎn)點(diǎn)，提取RNA時(shí)需要充分研磨破碎，我們這里只有細(xì)胞超生破碎儀，那么我這種情況可以用嗎? 一是超生破碎放熱，會(huì)影響RNA嗎？ 二是探頭該怎么處理��？用DEPC水沖洗？會(huì)不會(huì)很容易污染樣品？ 三是大概要破碎多久呢？設(shè)定的參數(shù)最好是多少��？怎么判斷破碎充分了呢？ 問(wèn)題有點(diǎn)多，謝謝大家了！ |
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ljapril
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10樓2012-05-23 23:54:38
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2樓2012-05-17 08:43:48
【答案】應(yīng)助回帖
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腦部？應(yīng)該是很容易裂解的組織。加入Trizol后用槍反復(fù)吸打多次即可裂解�？梢�(jiàn)組織均勻分散在Trizol里即已裂解，也可在吹散后靜置上5-10min確保裂解。 超聲也不是不可以，但相對(duì)來(lái)說(shuō)麻煩。且超聲放熱多少對(duì)RNA有些影響。且如是接觸式的探頭，容易引入污染。 |
3樓2012-05-17 09:01:13
ljapril
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4樓2012-05-17 11:50:42
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