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XUMIN6891金蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于畢赤酵母pPICZaA載體
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| 各位蟲友你們好！我想請(qǐng)教一下有誰用pPICZaA這個(gè)載體？另外我還想知道這個(gè)載體要是選Xho I酶切位點(diǎn)時(shí)必須加上AAAAGA這個(gè)序列是吧，這樣可以保證具有天然的N端，那如果我分析出來的我的已知的氨基酸序列用軟件分析中間存在信號(hào)肽的話，那樣是不是就不能做后期的克隆表達(dá)了，因?yàn)槌霈F(xiàn)的信號(hào)肽不是一處我的這段氨基酸序列是重復(fù)的，所以出現(xiàn)好多峰值，我對(duì)信號(hào)肽這塊不是太懂，想要請(qǐng)教一下！ |
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XUMIN6891
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7樓2012-05-19 11:47:04
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2樓2012-05-18 08:51:49
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3樓2012-05-18 15:04:28
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【答案】應(yīng)助回帖
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西瓜: 金幣+2, 專家考核, Good！ 2012-05-18 18:51:46
西瓜: 金幣+2, 專家考核, Good！ 2012-05-18 18:51:46
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1、選者Xhol I的優(yōu)點(diǎn)是能保證天然的N端，缺點(diǎn)是必須把信號(hào)肽切割位點(diǎn)的序列補(bǔ)全；選擇其他酶切位點(diǎn)就N端多出氨基酸來了； 2、能不能做后續(xù)的克隆表達(dá)不好說，別人是否表達(dá)過該序列，如表達(dá)過，你自然能做后續(xù)的克隆表達(dá)，如果沒有人做過，也不能說不能做，除非人家驗(yàn)證過不能做。其實(shí)，試驗(yàn)嘛，先看文獻(xiàn)，沒有文獻(xiàn)佐證就自己試試。 |
4樓2012-05-18 15:58:03
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