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sunnywill金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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植物PAL及CAT兩種酶測(cè)定中遇到的問(wèn)題 已有1人參與
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最近在測(cè)植物PAL及CAT酶活,遇到了些問(wèn)題,在此向有經(jīng)驗(yàn)的高手請(qǐng)教下經(jīng)驗(yàn)。希望高手能給予詳解 PAL測(cè)定的方法中有一種是:加苯丙氨酸與酶提取液后,立即保溫于30度15分鐘后,加200微升6M的HCl終止反應(yīng),在于290nm處測(cè)定吸光值變化。最終以吸光值每30分鐘或每小時(shí)變化0.01為一個(gè)酶活力單位。 我的疑問(wèn)是加酸終止反應(yīng)了,那么吸光值還會(huì)有變化嗎?是逐漸增加還是減小呢?不應(yīng)該是固定值嗎 而有些方法是不加酸終止反應(yīng)的, |
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專家經(jīng)驗(yàn): +426 |
| 你所提到的PAL測(cè)定,實(shí)際上是在保溫15分鐘后,測(cè)定樣品290nm吸光度值,以及不加樣品對(duì)照組吸光度值,兩者差值即吸光度值在15分鐘內(nèi)變化,根據(jù)這個(gè)計(jì)算半小時(shí)或一小時(shí)變化值并換算為活力單位。那個(gè)每半小時(shí)或一小時(shí)變化0.01只是活力單位的定義方式,并非實(shí)驗(yàn)過(guò)程。 |

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