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酶活測定中的問題
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求教。。。。本人新手,最近在做蔗糖代謝相關(guān)酶活性測定,有幾個問題想請教大家:: （1）.做酸/中性轉(zhuǎn)化酶測定時,是加0.2mL酶液+0.8mL酶反應(yīng)液,反應(yīng)30min后,加1mLDNS試劑反應(yīng)5min顯色,最后定容至10mL測OD值,計算公式是 酶活力=C*Vt*n/Fw*t*Vs這里的n是提取液測定的稀釋倍數(shù),這里到底指多少啊 ? ? ?有另外的酶活性結(jié)果計算方法嗎？ （2）.粗酶液透析袋透析后,體積發(fā)生變化,要不要定容至同一體積 ？？用蒸餾水定嗎？ 3.用的是殺死的酶液做對照，但是結(jié)果測出來和沒殺死酶液的實驗組相差不大!反而是沒加底物蔗糖的有差距，文獻(xiàn)上說是用殺死的酶液做對照，那沒加底物蔗糖做對照行不行，那可能是什么問題？？？ 4.有一種方法是硫酸銨鹽析測酶活性的，那么這種方法結(jié)果怎么計算呢？？ 一直沒做出來,試劑配置什么的沒有問題,  最近都快崩潰了 也不知道是哪出了問題，，，，勞煩高手賜教～～ 不勝感激～～大家有沒有已經(jīng)成熟詳細(xì)的蔗糖代謝相關(guān)酶活性的測定方法，，跪求發(fā)我1025197961@qq.com |
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2014-08-29 10:24
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dmbb3樓
2014-08-29 10:28
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2014-08-29 10:40
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2014-08-29 10:58
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tzynew9樓
2014-08-29 11:10
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小小小90(金幣+1): 謝謝參與
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