 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (5642)
- >考研 (2515)
- >導(dǎo)師招生 (2130)
- >文獻(xiàn)求助 (358)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (335)
- >碩博家園 (184)
- >休閑灌水 (162)
- >考博 (103)
- >招聘信息布告欄 (90)
- >基金申請(qǐng) (86)
- >博后之家 (69)
- >綠色求助(高懸賞) (48)
- >論文投稿 (47)
- >材料綜合 (24)
- >外文書(shū)籍求助 (17)
- >教師之家 (15)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1701 | 回復(fù): 9 | ||
[求助]
求助連接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒提取
|
|
請(qǐng)教一下，在我連接轉(zhuǎn)化以后，菌液PCR能檢測(cè)到單一的目的條帶，但是隔日我提取質(zhì)粒卻提不出來(lái)了，我的載體5K，目的片段2k，但是質(zhì)粒提取是在750-1k之前有一片拖帶，沒(méi)有任何條帶，這是為什么呢？？ 另外，如何能夠提高質(zhì)粒提取的量？我用的是普通的質(zhì)粒小提試劑盒，我的提出來(lái)都在40ng/μl左右，但是人家都說(shuō)能達(dá)到好幾百？請(qǐng)教。謝謝各位！ |
回復(fù)此樓» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
kenhtsjj» 猜你喜歡
316求調(diào)劑
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
chinese chemical letters英文版投稿求助
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
264分，求任意工科調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
求生物學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
求調(diào)劑 302分初試 0854
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
交通運(yùn)輸考試264分求工科調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料與化工306分找調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿北京科技材料科學(xué)與工程288分，求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
413求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
319求調(diào)劑
已經(jīng)有14人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 做酶切連接后轉(zhuǎn)化再提質(zhì)粒，質(zhì)粒明顯變小，Why???
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助】真核基因在原核生物表達(dá)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】連接轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒DNA可以不通過(guò)酶切直接跑電泳檢測(cè)嗎？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒雙酶切連接問(wèn)題
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于連接轉(zhuǎn)化 急需！
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化后菌落PCR正確，提取的質(zhì)粒卻比空質(zhì)粒還��？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】目的片段與載體連接不上
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】連接轉(zhuǎn)化長(zhǎng)菌有質(zhì)粒，但是沒(méi)有目的片段，怎么回事？？
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】菌落PCR問(wèn)題
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 【求助/交流】基因克隆實(shí)驗(yàn)為非目的片段？
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 【求助/交流】質(zhì)粒pPICZA酶切問(wèn)題
已經(jīng)有5人回復(fù)
2樓2012-06-04 15:41:32
3樓2012-06-04 18:38:13
 |
4樓2012-06-07 13:48:21
yanying198
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 171.7
- 散金: 7
- 紅花: 1
- 帖子: 136
- 在線: 84.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1038612
- 注冊(cè): 2010-06-09
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
kenhtsjj: 金幣+2, ★有幫助, 我用的是熱激，這個(gè)操作應(yīng)該是沒(méi)有什么問(wèn)題，再換盒子嘗試中~~~謝謝~ 2012-06-10 13:32:10
kenhtsjj: 金幣+1 2012-06-10 13:32:50
kenhtsjj: 金幣+2, ★有幫助, 我用的是熱激，這個(gè)操作應(yīng)該是沒(méi)有什么問(wèn)題，再換盒子嘗試中~~~謝謝~ 2012-06-10 13:32:10
kenhtsjj: 金幣+1 2012-06-10 13:32:50
|
菌落PCR有時(shí)候會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性。用熱激的方法轉(zhuǎn)化，效率應(yīng)該挺高的，我們一般是直接挑單克隆，然后提取質(zhì)粒，電泳驗(yàn)證。 提取質(zhì)粒最重要的是加溶液III，千萬(wàn)不可以劇烈，否則質(zhì)粒會(huì)斷裂。個(gè)人想法，可以參考。 |
5樓2012-06-07 21:13:48
504775490
金蟲(chóng) (知名作家)
- 應(yīng)助: 51 (初中生)
- 金幣: 5689.2
- 散金: 1155
- 紅花: 22
- 帖子: 9590
- 在線: 290小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1309424
- 注冊(cè): 2011-05-29
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
kenhtsjj: 金幣+2, ★有幫助, 謝謝！ 2012-06-10 13:32:36
kenhtsjj: 金幣+2, ★有幫助, 謝謝！ 2012-06-10 13:32:36
| 個(gè)人認(rèn)為PCR不是十分準(zhǔn)確的，至于質(zhì)粒提不出來(lái)，如果試劑盒沒(méi)問(wèn)題的話，那就是質(zhì)粒本身的問(wèn)題，按說(shuō)明書(shū)操作一般不會(huì)有什么問(wèn)題，我今天提的質(zhì)粒就是濃度不高也就五六十的樣子，但給師姐帶的兩個(gè)樣就400多。還有可以多搖點(diǎn)菌液，密度大一點(diǎn)再提也許會(huì)好一點(diǎn)，個(gè)人觀點(diǎn)，僅供參考！ |
6樓2012-06-07 22:10:35
7樓2012-06-09 23:18:21
tangyuntao
銅蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 201.9
- 帖子: 79
- 在線: 45.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2107506
- 注冊(cè): 2012-11-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物進(jìn)化生物學(xué)
8樓2012-12-18 17:31:25
9樓2012-12-20 15:09:03
lw90417
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 18.5
- 帖子: 8
- 在線: 2.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2217750
- 注冊(cè): 2013-01-02
10樓2013-01-12 22:41:48
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 kenhtsjj 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 318求調(diào)劑，計(jì)算材料方向 +10 | 吸喵有害笙命 2026-04-01 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600，材料與化工321分求調(diào)劑 +11 | 大饞小子 2026-03-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 能源動(dòng)力 調(diào)劑 +3 | 不破不立0 2026-04-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 一志愿哈工大總分298分，前三科223分 +12 | dongfang59 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑！生物與醫(yī)藥專碩 +4 | 逆轉(zhuǎn)陸先生 2026-04-01 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +10 | 呢呢妮妮 2026-04-01 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +12 | 一樣YWY 2026-04-01 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 08工科275分求調(diào)劑 +13 | AaAa7420 2026-03-31 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 085602化學(xué)工程268分蹲調(diào)劑 +8 | 月照花林。 2026-04-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +12 | 小熊～～ 2026-03-31 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +9 | A child 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 考研材料工程351分調(diào)劑 +5 | 整個(gè)好的 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 335求調(diào)劑 +3 | 321* 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +10 | 陳晨79 2026-03-30 | 10/500 |
|
|
|
[考研]
 物理學(xué)調(diào)劑
+4
|
小羊36 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085601 329分調(diào)劑 +6 | yzsa12 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 266分，求材料相關(guān)專業(yè)調(diào)劑 +10 | 哇呼哼呼哼 2026-03-30 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 085600 286分 材料求調(diào)劑 +11 | 麻辣魷魚(yú) 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 356求調(diào)劑 +3 | gysy?s?a 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 394求調(diào)劑 +3 | 好事多磨靜候佳?/a> 2026-03-26 | 5/250 |
|