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cqyniu金蟲 (小有名氣)
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[求助]
測序正確的質(zhì)粒用SfiI酶切不動，請問有什么相關(guān)文獻嗎
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| 測序正確的質(zhì)粒用SfiI酶切不動，請問有什么相關(guān)文獻嗎？或者相關(guān)資料 |
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gongeleven
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+2, 貌似是一篇很有用的文獻哈~ 2012-06-05 08:37:16
cqyniu: 金幣+10 2012-06-05 09:53:03
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cqyniu: 金幣+10 2012-06-05 09:53:03
| SfiI requires two copies of its recognition sequence for cleavage to occur. The two sites can be on either the same or different DNA molecules. Wertzell L.M. et al., (1995) J. Mol. Biol. 248:581-595. |
2樓2012-06-04 18:39:02
jasco
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5樓2012-06-05 09:52:15
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【答案】應(yīng)助回帖
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cqyniu: 金幣+15, ★★★很有幫助 2012-06-05 11:18:40
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就是這篇文獻，請查收 |
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2012-06-05 10:37:46, 713.87 K
6樓2012-06-05 10:38:42
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
cqyniu: 金幣+2 2012-06-08 10:44:49
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
cqyniu: 金幣+2 2012-06-08 10:44:49
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這個酶非常特別， 需要高的反應(yīng)溫度， 過夜培養(yǎng)。 1.特別要注意DNA的純度，一定要高。 2. 如果是在質(zhì)粒上， 應(yīng)該沒啥問題；如果是在PCR產(chǎn)物中， 要看看有沒有保護堿基。 3. 需要酶切過夜，用新酶。 4. 因為是高溫酶切， 所以建議用個小管做酶切， 比如PCR管，因為如果用1.5ml的EP管做酶切的話， 第二天， 你就會發(fā)現(xiàn)蓋子上， 有很多結(jié)晶水， 而底部的體積都蒸發(fā)到頂上去了。 這一點特別重要 |
7樓2012-06-05 11:12:55
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