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yinchengmiao銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
土壤DNA提取，真菌通用引物PCR，瓊脂糖電泳圖，感覺有問題，新手求助
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第一張圖片瓊脂糖濃度為1%，PCR反應(yīng)體系，mix 25ul，上下游引物各2ul，模板為5ul，反應(yīng)體系為50ul。反應(yīng)條件：94預(yù)變性2min，94變性30秒，50退火30秒，72延伸1min15秒，36個循環(huán)，終延伸72,10min，電泳上樣量為10ul，100bp Ladder 上樣量為5ul. 第二張圖片瓊脂糖濃度為2%，PCR反應(yīng)體系，mix 25ul，上下游引物各2ul，模板為10ul，反應(yīng)體系為50ul。反應(yīng)條件：94預(yù)變性2min，94變性30秒，50退火30秒，72延伸1min15秒，36個循環(huán)，終延伸72,10min，電泳上樣量為20ul，100bp Ladder 上樣量為10ul.為什么條帶那樣啊？新手求原因，望大家多多指教 上樣量10ul 上樣量20ul，出現(xiàn)兩個亮條帶的PCR加的模板量是出現(xiàn)一個兩條帶的兩倍 |
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sheng-ping
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7樓2012-06-18 16:15:58
yinchengmiao
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4樓2012-06-18 13:41:13
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