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hxswdl至尊木蟲 (文壇精英)
Tortoise
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[求助]
pcr 擴(kuò)不出目的帶啊,求幫忙
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以基因組為模板擴(kuò)得出2500多bp的片段,換引物想再加擴(kuò)上游的300多bp就怎么也只能出1500bp以下的明亮條帶!降低退火溫度到50,2500以上有2個(gè)靠的很近很暗的帶,不好切膠回收!試過降落,最終退火52與60都試過,沒用!求高手指點(diǎn)! 還有個(gè)問題,用能擴(kuò)出基因組的引物去擴(kuò)cdna,一條帶都沒有!cdna 的polya前面一部分與基因組有差別,用cdna的polya前一部分堿基為下游引物,5'端開始一部分為上游引物,cdna為模板,p出來跑電泳也是空無一物,求解釋。。。ㄓ檬謾C(jī)編了一遍 沒發(fā)成功,現(xiàn)在用電腦,居然還有記錄,蟲蟲好貼心。 |

至尊木蟲 (文壇精英)
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至尊木蟲 (文壇精英)
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