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hxswdl至尊木蟲(chóng) (文壇精英)
Tortoise
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[求助]
pcr 擴(kuò)不出目的帶啊，求幫忙
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以基因組為模板擴(kuò)得出2500多bp的片段，換引物想再加擴(kuò)上游的300多bp就怎么也只能出1500bp以下的明亮條帶！降低退火溫度到50，2500以上有2個(gè)靠的很近很暗的帶，不好切膠回收！試過(guò)降落，最終退火52與60都試過(guò)，沒(méi)用��！求高手指點(diǎn)！ 還有個(gè)問(wèn)題，用能擴(kuò)出基因組的引物去擴(kuò)cdna，一條帶都沒(méi)有！cdna 的polya前面一部分與基因組有差別，用cdna的polya前一部分堿基為下游引物，5'端開(kāi)始一部分為上游引物，cdna為模板，p出來(lái)跑電泳也是空無(wú)一物，求解釋啊�。。ㄓ檬謾C(jī)編了一遍 沒(méi)發(fā)成功，現(xiàn)在用電腦，居然還有記錄，蟲(chóng)蟲(chóng)好貼心�。� |
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2樓2012-08-18 19:27:37
hxswdl3樓2012-08-23 00:15:34
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4樓2013-11-20 00:49:41
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