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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 熒光定量PCR結果如何處理
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20111987金蟲 (正式寫手)
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[求助]
熒光定量PCR結果如何處理
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| 大家好，我剛做完一批熒光定量PCR，結果如附件所示，但是，結果該如何處理，多種不懂啊，得到的數(shù)據各平行之間重復性不好，可能原因會有哪些？對照組和處理組結果之間的差異是否顯著怎么確定？請各位大俠幫忙看一下，謝謝！ |
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2012-10-05 10:22:21, 14.5 K
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20111987
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4樓2012-10-05 15:43:19
mamadexiao
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【答案】應助回帖
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前提：目標序列和內參序列的擴增效率接近100％且偏 差在 5％以內 1、用內參基因的CT值歸一目標基因的CT值： ΔCT（test)= CT （target,test) - CT （ref,test) ΔCT（calibrator)= CT （target, calibrator) - CT （ref, calibrator) 2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值： ΔΔCT= ΔCT（test) - ΔCT（calibrator) 3、計算表達水平比率： 2 –ΔΔCT=表達量的比值 |
2樓2012-10-05 10:47:50
20111987
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5樓2012-10-05 20:54:14
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