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zh6yan新蟲 (初入文壇)
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粗提的DNA量太少，pcr都出不來產(chǎn)物，怎樣能濃縮一下呢？ 已有3人參與
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| 粗提的DNA量太少，pcr都出不來產(chǎn)物，怎樣能濃縮一下呢？ |
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銅蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
| PEG沉淀用的最多了，但是我個人覺得沒有BIOG便捷，PEG-8000濃縮法：1. 5X PEG8000+NaCl配制 稱取NaCl 8.766 g; PEG8000 50g溶解在200ml Milli-Q純水中；121攝氏度 30min 濕熱滅絕 30min；保存在4℃。2. 濾頭過濾慢病毒上清液；3. 每30ml過濾后的病毒初始液，加入5X PEG-8000+NaCl母液7.5 ml；4. 每20～30min混合一次，共進(jìn)行3-5次；5. 4度放置過夜；6. 4度，4000 g，離心 20min；7. 吸棄上清，靜置管子1～2分鐘，吸走殘余液體；8. 加入適量的慢病毒溶解液溶解慢病毒沉淀；9. 集中后的病毒懸液分裝成50 μl每份，保存在成品管中。用碎干冰速凍后儲存在-80 ℃ |
7樓2020-03-11 13:56:08
hippo_li
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2樓2012-10-21 16:42:05
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3樓2012-10-22 00:35:04
beishui
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4樓2012-10-22 08:46:05
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