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xuanchen001銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
包涵體 原核表達(dá)
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| 原核表達(dá)，以包涵體形式表達(dá)的蛋白質(zhì)沒有活性，怎么檢測就是自己的目的蛋白，Western-Blot行嗎？ |
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cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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我覺得可能得分兩個方面來看待樓主的這個問題： 1. 檢測表達(dá)的蛋白是否為目的蛋白，如樓上所言的，可以通過表達(dá)中對比陰性對照來判斷及WB檢測，WB最好用特異抗體，同時表達(dá)產(chǎn)物無須溶解，直接電泳就好了； 2. 若是目的是想了解其活性，那么則需要經(jīng)過變、復(fù)性的過程，這個比較復(fù)雜。WB檢測的蛋白是變性狀態(tài)下，活性只能通過建立活性測試的方法來鑒定。 |
4樓2012-11-19 09:29:58
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