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xuanchen001銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
包涵體 原核表達(dá)
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| 原核表達(dá)，以包涵體形式表達(dá)的蛋白質(zhì)沒有活性，怎么檢測(cè)就是自己的目的蛋白，Western-Blot行嗎？ |
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linxt2005
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【答案】應(yīng)助回帖
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xuanchen001: 回帖置頂 2012-11-19 20:54:59
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我覺得可能得分兩個(gè)方面來看待樓主的這個(gè)問題： 1. 檢測(cè)表達(dá)的蛋白是否為目的蛋白，如樓上所言的，可以通過表達(dá)中對(duì)比陰性對(duì)照來判斷及WB檢測(cè)，WB最好用特異抗體，同時(shí)表達(dá)產(chǎn)物無須溶解，直接電泳就好了； 2. 若是目的是想了解其活性，那么則需要經(jīng)過變、復(fù)性的過程，這個(gè)比較復(fù)雜。WB檢測(cè)的蛋白是變性狀態(tài)下，活性只能通過建立活性測(cè)試的方法來鑒定。 |
4樓2012-11-19 09:29:58
cicelyzh
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2樓2012-11-19 05:46:37
lishg1985
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3樓2012-11-19 08:12:36
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