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基因敲除不成功
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| 做基因敲初時(shí)，當(dāng)一段抗性基因電轉(zhuǎn)進(jìn)大腸桿菌后，出現(xiàn)抗性表型，但是PCR驗(yàn)證時(shí)發(fā)現(xiàn)沒有敲除成功，這是什么原因啊？ |
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weigh1111
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
amisking: 金幣+4, 鼓勵(lì)積極發(fā)帖幫助解答問題。 2012-11-26 20:22:04
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首先帶個(gè)陽性對(duì)照做PCR看看是不是PCR的問題，實(shí)在不行做southern blit，這個(gè)更加可信 如果陽性對(duì)照沒問題的話就說明是假陽性，可以考慮提高下抗生素濃度什么的（順便問下你是什么抗生素哦，有些抗生素容易出假陽性）~ 做敲除的時(shí)候最好多挑點(diǎn)轉(zhuǎn)化子都驗(yàn)證一下，就算有假的至少能挑到真的~ |
2樓2012-11-26 17:37:25
3樓2012-11-28 09:55:14
weigh1111
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4樓2012-11-28 14:37:07
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6樓2012-11-29 10:57:51
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