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[求助]
多個基因共表達純化問題
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請教共表達兩個基因以及表達后如何純化。具體為 兩個基因都有完整閱讀框，之間加有rbs，如何連接到pet28，能實現(xiàn)共表達嗎？ 另外，就是如果共表達了，第一個蛋白可以利用載體的His標(biāo)簽純化，那第二個也能純化嗎？如果不能，是不是應(yīng)該在它前面加上His標(biāo)簽?zāi)兀? |
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5樓2012-11-29 15:12:45
2樓2012-11-29 11:43:58
susizheng
木蟲 (著名寫手)
我們是糖 甜到憂傷
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1、連接的話，先連接A基因到pet28，B基因借助另外一個載體，連接后，擴增RBS-B基因進行第二次連接； 2、T7啟動子共表達兩個基因沒問題。 3、共表達主要是做催化用的，做純化沒必要共表達吧。分開表達純化不是更好？ 如果確實像同時純化也行，在擴增第二個基因的引物上加上his標(biāo)簽就行。 |
3樓2012-11-29 13:55:08
4樓2012-11-29 15:04:24
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