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shizishanshang至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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[求助]
請問His-tag（組氨酸標簽）怎么加到我的蛋白上去？ 已有1人參與
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大家好，我實驗過程中需要做幾個抗體（這些是一抗），向老外咨詢制作過程，回信說 The best is to subclone the hydrophilic loop of A proteins or cytoplasmic region of B proteins, express in the E. coli with His-tag, purify the protein and send it for immunization in Rabbit or Rat or Mouse. 因為我做的是兩大類蛋白，姑且以A和B代替。 我看老外的意思是要我分別克隆一段特殊的序列（這個序列我知道，就是我的蛋白的其中一段），然后加上 His-tag（組氨酸標簽）在E. coli 中表達，然后再提取純化蛋白后在兔子或老鼠中獲得抗體？ 這中間有個問題，怎么加上 His-tag（組氨酸標簽）？是直接設(shè)計引物引進 His-tag（組氨酸標簽），還是按照有些人說的轉(zhuǎn)到PET-30a這樣還有 His-tag（組氨酸標簽）的載體上獲得？ 請問有沒有同學(xué)做過加 His-tag（組氨酸標簽）的實驗啊，請指教�。� [ Last edited by silicare on 2014-3-28 at 14:03 ] |
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