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[求助]
PCR退火溫度
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| PCR退火溫度，試了50，55，60度，都沒有擴(kuò)增出來，怎么回事，接下來該怎么做��？求大師指點(diǎn)。 |
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dongrh1981
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【答案】應(yīng)助回帖
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首先，確認(rèn)你所用的試劑是哪些廠家的，有沒有問題？ 其次，你提取的核酸是否OK，濃度和純度能不能達(dá)到PCR要求？ 最后，在做PCR時(shí)，帶一個(gè)陰性質(zhì)控和一個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控，用于判斷你的PCR試劑和PCR條件是否有問題。 一般來說引物長(zhǎng)度在24bp左右時(shí)，退火溫度55度左右應(yīng)該是可以做出來的，所以建議你多考慮下前面的準(zhǔn)備工作是否OK。 最好是將你的實(shí)驗(yàn)試劑、實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行詳細(xì)描述，否則無法判斷具體原因 |
2樓2012-12-21 11:41:58
platanus
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3樓2012-12-21 11:42:40
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7樓2012-12-21 16:52:01
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10樓2012-12-21 22:18:45
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