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PCR不出目的條帶的原因
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各位蟲友們，小女子有問(wèn)題想請(qǐng)教，望大家給出寶貴意見。 為什么PCR同一個(gè)基因，同一個(gè)模板，換了引物，但每次p出來(lái)的條帶都在500左右的樣子啊？目的條帶是2000時(shí)，p出來(lái)的是500，目的條帶是1500時(shí)，p出來(lái)也還是500，我們排除了引物、模板、酶、buffer等原因，退火溫度也盡量低，但為什么還是得不到目的條帶呢？ |
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 PCR技術(shù) |
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2樓2012-12-26 18:37:27
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3樓2012-12-26 18:40:17
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4樓2012-12-26 19:09:32
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-12-27 16:51:59
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哈哈 LZ又開了個(gè)新帖子啊 上一帖其實(shí)說(shuō)的都差不多了 問(wèn)題應(yīng)該不大 不過(guò)在論壇上沒(méi)有具體信息很難弄清楚 我的建議依然是弄個(gè)陽(yáng)性樣品測(cè)試，比如這個(gè)基因的質(zhì)粒，確定所有體系都工作，然后再做病人樣品，發(fā)現(xiàn)大小不一致拿去測(cè)序 而且建議LZ請(qǐng)自己組里做分子克隆方面經(jīng)驗(yàn)豐富的前輩幫你從頭梳理解決 或者把關(guān)鍵的引物信息寫出來(lái) 有時(shí)間的蟲友可以幫你仔細(xì)看看 |
5樓2012-12-26 20:03:25
6樓2012-12-26 23:07:01
7樓2012-12-26 23:08:53
ccharlien
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8樓2012-12-26 23:51:05
9樓2012-12-27 09:59:48
10樓2012-12-28 10:06:47
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