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[求助]
PCR不出目的條帶的原因
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各位蟲友們，小女子有問題想請教，望大家給出寶貴意見。 為什么PCR同一個基因，同一個模板，換了引物，但每次p出來的條帶都在500左右的樣子��？目的條帶是2000時，p出來的是500，目的條帶是1500時，p出來也還是500，我們排除了引物、模板、酶、buffer等原因，退火溫度也盡量低，但為什么還是得不到目的條帶呢？ |
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 PCR技術(shù) |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-12-27 16:51:59
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哈哈 LZ又開了個新帖子啊 上一帖其實說的都差不多了 問題應(yīng)該不大 不過在論壇上沒有具體信息很難弄清楚 我的建議依然是弄個陽性樣品測試，比如這個基因的質(zhì)粒，確定所有體系都工作，然后再做病人樣品，發(fā)現(xiàn)大小不一致拿去測序 而且建議LZ請自己組里做分子克隆方面經(jīng)驗豐富的前輩幫你從頭梳理解決 或者把關(guān)鍵的引物信息寫出來 有時間的蟲友可以幫你仔細(xì)看看 |
5樓2012-12-26 20:03:25
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