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ljapril

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[求助] WB轉(zhuǎn)膜后出現(xiàn)的問(wèn)題

做WB，需要轉(zhuǎn)一個(gè)快300KD的蛋白，轉(zhuǎn)完膜后發(fā)現(xiàn)上面的泳道特別清楚，這是怎么回事呢？之前做過(guò)一些100一下的蛋白，轉(zhuǎn)過(guò)的膜都是白色的，什么都看不到的，這次很奇怪，有誰(shuí)曉得這是怎么回事嗎

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1樓 2013-01-01 21:29:28

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ljapril

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5樓: Originally posted by Lester11 at 2013-01-01 22:10:01
染過(guò)了話就可以啦，但是看不清條帶，可能雜蛋白的量太多了吧，或者當(dāng)初加樣的量太多，跑出來(lái)分不清楚了

加樣總蛋白大概是40μg，一般做將近300的蛋白要跑多久的膠呢？沒(méi)那么大的marker，都不知道蛋白進(jìn)了分離膠沒(méi)

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9樓2013-01-02 09:31:57

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2樓2013-01-01 21:36:41

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ljapril: 金幣+1, ★有幫助 2013-01-07 09:47:56

如果染色后出現(xiàn)清晰的泳道，那就說(shuō)明western blot和轉(zhuǎn)膜效果還不錯(cuò)，但是染色前這樣那就說(shuō)不通了。

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3樓2013-01-01 21:39:25

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引用回帖:

3樓: Originally posted by Lester11 at 2013-01-01 21:39:25
如果染色后出現(xiàn)清晰的泳道，那就說(shuō)明western blot和轉(zhuǎn)膜效果還不錯(cuò)，但是染色前這樣那就說(shuō)不通了。

這是麗春紅染后又洗掉的樣子，但是膜剛拿出來(lái)是也和這個(gè)差不多哦

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4樓2013-01-01 21:47:23

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