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依陌影新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
SDS-PAGE 同工酶電泳必須要復(fù)性嗎？
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如題，做POD同工酶變性凝膠電泳，7.5％分離膠，10％濃縮膠，沒(méi)有復(fù)性，染色（醋酸聯(lián)苯胺）后，一片白色（如圖），用相機(jī)拍的，1100萬(wàn)像素，請(qǐng)幫忙分析原因？還有幾個(gè)其他問(wèn)題求助： 1、電泳上樣液可以保存多久 2、電極緩沖液有大量泡沫（買(mǎi)的99％的SDS沒(méi)有純化） 3、不拿瓊脂封底，直接灌膠，可以嗎 4、電泳應(yīng)該穩(wěn)壓還是穩(wěn)流，應(yīng)該多少伏（安） 5、用數(shù)碼相機(jī)照相可以嗎 6、所有試劑都是蒸餾水配的可以嗎 IMG_1220_副本.JPG |
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竹林里的小蛇
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
依陌影: 金幣+1, ★有幫助, 曲拉通復(fù)性之后做出來(lái)了，謝謝 2013-01-05 14:00:35
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
依陌影: 金幣+1, ★有幫助, 曲拉通復(fù)性之后做出來(lái)了，謝謝 2013-01-05 14:00:35
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我來(lái)回答你的問(wèn)題。 1.電泳上樣緩沖液4℃可以長(zhǎng)期保存。 2.最好是減少泡沫的存在 3.直接灌膠是可以的，bio-rad的制膠器都不用封底。 4.恒流或恒壓都是可以的，無(wú)明顯區(qū)別，電流是20---30mA，電壓80v-100v吧（不是很清楚，因?yàn)槲伊?xí)慣于恒流跑）。 5.數(shù)碼相機(jī)是可以的，但一定要用白板做底，最好白板下有燈光。其實(shí)如果有凝膠成像儀更好，更方便。 6.蒸餾水勉強(qiáng)可以，但最好能用miniQ水。 |
3樓2013-01-03 11:12:04
初生之牛犢
新蟲(chóng) (初入文壇)
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2樓2013-01-03 08:41:33
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