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tdl666

銅蟲 (初入文壇)

[求助] 霉菌18SrDNA鑒定,構(gòu)建發(fā)育樹的問題

小弟在分子生物學(xué)上是小白一個(gè),將一株菌(斜面)送出去做18SrDNA測(cè)序后,在ncbi上blast出一些相似性較高的序列,發(fā)現(xiàn)序列相似度在99%以上的為L(zhǎng)ichtheimia ramosa橫梗霉屬和Absidia corymbifera犁頭霉屬, 而序列翻譯成蛋白后存在很多斷點(diǎn),沒有完整的開放式閱讀框;用NJ法建樹后看不出它的同源性,呈獨(dú)立的分支,
  也有的說這是Lichtheimia ramosa和Absidia corymbifera同一類菌,但小弟的發(fā)育樹作不來,用EzTaxon server 2.1比對(duì)發(fā)表過的最高的是菌株Mycosphaerella mycopappi ATCC 64711,才80.605%,但菌株形態(tài)學(xué)上很像犁頭霉,我打電話問鑒定機(jī)構(gòu)后,說我的菌種就那樣,出現(xiàn)這種情況是我菌株自身的問題,不是他們測(cè)得不準(zhǔn),請(qǐng)問大家覺得是他們測(cè)得不準(zhǔn),還是我發(fā)育樹做的不好,但小弟做其他菌的發(fā)育樹一般都沒問題。分離的菌株       
和數(shù)據(jù)庫比較相似度較高的菌株        相似度(%)
MA-1        Absidia corymbifera(AF113408)        99.71
        Lichtheimia ramosa(JQ004932)        99.65
        Lichtheimia ramosa(JQ004933)        99.53
        Absidia corymbifera(AF113407)        98.43
        Lichtheimia corymbifera(JQ004931)        98.43
        Absidia blakesleeana(AF157117)        97.92
        Dichotomocladium elegans(AF157131)        90.42
        Absidia idahoensis(EU826361)        99.64
        Lichtheimia ramosa(JQ775424)        100.00
        Lichtheimia ramosa(JQ775419)        99.91
        Lichtheimia ramosa(JQ775458)        100.00
        Lichtheimia ramosa(JQ775456)        100.00
        Absidia hyalospora(EU826360)        97.77
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拂袖江湖

銅蟲 (初入文壇)

【答案】應(yīng)助回帖


感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
zhang8826857: 金幣+1, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2013-01-06 22:46:58
真菌的18s變異率太低,及時(shí)是真菌通用的ITS在對(duì)某些毛霉也不太合適,現(xiàn)在普遍地做法是用多基因建樹,你可以嘗試多p幾個(gè)基因片段 組合在一起建樹
6樓2013-01-06 08:48:59
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oldflying

木蟲 (正式寫手)

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
會(huì)不會(huì)是軟件的問題呢?我以前用的是Mega建的系統(tǒng)發(fā)育樹,但具體怎么樣我也不是很懂。

» 本帖已獲得的紅花(最新10朵)

一個(gè)人的努力和堅(jiān)持!
2樓2013-01-05 19:46:23
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tdl666

銅蟲 (初入文壇)

還有菌種鑒定機(jī)構(gòu)建議我再做ITS序列,但也不保證結(jié)果,這個(gè)有道理嗎?
3樓2013-01-05 19:50:56
已閱   回復(fù)此樓   關(guān)注TA 給TA發(fā)消息 送TA紅花 TA的回帖

tdl666

銅蟲 (初入文壇)

送鮮花一朵
引用回帖:
2樓: Originally posted by oldflying at 2013-01-05 19:46:23
會(huì)不會(huì)是軟件的問題呢?我以前用的是Mega建的系統(tǒng)發(fā)育樹,但具體怎么樣我也不是很懂。

我也找了很多人做了,用的也是Mega,雖然樹建的不大一樣,但都做的在一個(gè)分支上,序列很奇怪。
4樓2013-01-05 19:53:15
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