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sunzhengwang鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
RNA 提取如何保證質(zhì)量 已有1人參與
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| 最近在反復(fù)提取細(xì)胞RNA,但是提取出來的RNA A260/280和A260/230都在(2.0-2.1)這個(gè)范圍，各位大神們給點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)，幫幫我吧 |
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lidonghong
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5樓2013-02-28 16:37:43
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2樓2013-02-28 10:41:06
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3樓2013-02-28 14:41:38
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2013-03-01 13:43:07
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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2013-03-01 13:43:07
| 如果用的是trizol法，一開始的研磨要盡量破碎，建議液氮+超聲波一起用；取上清的時(shí)候接近白層部分不要（寧缺毋濫）；留下白色沉淀與管底壁后，再短暫離心吸除管壁剩余上清；OD值在1.8-2.0均可，你這個(gè)范圍說明RNA有降解，可能是沒用低溫離心機(jī)造成的（也可能細(xì)胞本身時(shí)間過長降解）？如果用的是試劑盒法，那也是類似的在研磨和去上清步驟中要注意。另外一般來說OD值只是參考，跑膠才更準(zhǔn)確些。祝你成功 |
4樓2013-02-28 15:33:24
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