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lezhen_22鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
有關(guān)NEB內(nèi)切酶NdeI和XhoI的雙酶切問題 已有4人參與
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| 有用過NEB內(nèi)切酶NdeI和XhoI雙酶切的大俠嗎,請高手指點(diǎn),用該兩種酶來切空載體,需要多長時間。如果切目的片段呢,我的目的片段的兩個酶切位點(diǎn)前都只有兩個保護(hù)堿基,會不會效率很低,需要切多長時間? |
金蟲 (小有名氣)
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一般來說,兩個保護(hù)堿基就足夠了。 關(guān)于雙酶切設(shè)計,我建議你使用double digestion designer,http://www.bioinfomatics.cn/enzyme/showresult.php ,可以根據(jù)你質(zhì);蛘逷CR產(chǎn)物的大小和質(zhì)粒的質(zhì)量,精確計算完全酶切所需要的酶量,不用擔(dān)心酶切不完全,當(dāng)然,前提是你的酶保存恰當(dāng),沒有失活,質(zhì)粒的質(zhì)量也沒問題。 祝好運(yùn)! |
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鐵蟲 (小有名氣)

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