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lezhen_22鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
有關(guān)NEB內(nèi)切酶NdeI和XhoI的雙酶切問(wèn)題 已有4人參與
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| 有用過(guò)NEB內(nèi)切酶NdeI和XhoI雙酶切的大俠嗎，請(qǐng)高手指點(diǎn)，用該兩種酶來(lái)切空載體，需要多長(zhǎng)時(shí)間。如果切目的片段呢，我的目的片段的兩個(gè)酶切位點(diǎn)前都只有兩個(gè)保護(hù)堿基，會(huì)不會(huì)效率很低，需要切多長(zhǎng)時(shí)間？ |
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7樓2013-03-19 10:12:31
酶切專家
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
kx444555: 金幣+3, 很詳細(xì) 2013-03-18 18:07:38
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
kx444555: 金幣+3, 很詳細(xì) 2013-03-18 18:07:38
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一般來(lái)說(shuō)，兩個(gè)保護(hù)堿基就足夠了。 關(guān)于雙酶切設(shè)計(jì)，我建議你使用double digestion designer，http://www.bioinfomatics.cn/enzyme/showresult.php ，可以根據(jù)你質(zhì)�；蛘逷CR產(chǎn)物的大小和質(zhì)粒的質(zhì)量，精確計(jì)算完全酶切所需要的酶量，不用擔(dān)心酶切不完全，當(dāng)然，前提是你的酶保存恰當(dāng)，沒(méi)有失活，質(zhì)粒的質(zhì)量也沒(méi)問(wèn)題。 祝好運(yùn)！ |
2樓2013-03-13 22:00:10
gyesang
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3樓2013-03-14 00:13:19
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4樓2013-03-15 12:52:24
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