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林曉竹110

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[求助] DNA的電泳圖

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為什么用CTAB法提的DNA兩次電泳圖不一樣的呢

DNA2013-3-28.jpg

DNA .jpg

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好好奮斗實(shí)驗(yàn)?zāi)?

1樓 2013-03-31 16:14:53

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wchuangqi

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引用回帖:

5樓: Originally posted by wchuangqi at 2013-04-01 07:13:13
首先我不知道你為什么要跑DNA呢？如果用于PCR，我覺得沒有必要跑電泳。另外在提完的DNA用水溶液溶解的時(shí)候，可以叫一些RNA酶去除一些RNA。

如果只是確定有沒有提出來(lái)DNA，完全沒有必要跑電泳。你可以拿一個(gè)其他已知能擴(kuò)出條帶的引物作為PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果你的條帶仍然不能擴(kuò)出來(lái)，要仔細(xì)Blast你的引物是否特異。如果不特異，可以考慮換引物。如果你的CTAB是別人用的可以做出來(lái)的，那么我確定你最后的DNA沒有問題，沒有必要跑電泳。但是如果你的CTAB是你自己配的新的，那么就用其他引物作為陽(yáng)性對(duì)照。

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天道酬勤

15樓2013-04-02 01:32:47

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你后來(lái)提的那個(gè)RNA比較多啊……
第一次提的也有，不過比較少。
建議DNaseI處理下。

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2樓2013-03-31 22:36:41

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首先我不知道你為什么要跑DNA呢？如果用于PCR，我覺得沒有必要跑電泳。另外在提完的DNA用水溶液溶解的時(shí)候，可以叫一些RNA酶去除一些RNA。

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天道酬勤

5樓2013-04-01 07:13:13

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牧歌ping

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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2013-04-01 16:04:19

CTAB法提取DNA算是好提吧，溶解后黏糊糊的像膠水一樣，一般是稀釋十倍再做后續(xù)實(shí)驗(yàn)。提取DNA的時(shí)候忌劇烈震蕩，否則DNA會(huì)斷裂不完整。你第一張DNA很好，明顯沒有雜帶；第二張DNA濃度都不高，反而RNA很亮，前沿也很亮，估計(jì)是DNA振斷了。

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10樓2013-04-01 16:00:33

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第一張圖是最后跑的膠圖是吧，應(yīng)該沒問題，能用

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平常心

11樓2013-04-01 18:27:02

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cicelyzh

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引用回帖:

9樓: Originally posted by 林曉竹110 at 2013-04-01 12:31:26
看來(lái)還是用用RNA酶處理的啊呵呵...

如果你要的是純的DNA，是應(yīng)該用RNase處理一下。不過，如果你只是用來(lái)做PCR的模板，RNA混在里面也無(wú)所謂的。

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12樓2013-04-01 23:29:16

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Leo_xin

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2樓: Originally posted by jk_xdx at 2013-03-31 22:36:41
你后來(lái)提的那個(gè)RNA比較多啊……
第一次提的也有，不過比較少。
建議DNaseI處理下。

人家好像是抽DNA吧，。。。

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13樓2013-04-02 01:13:55

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3樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-01 00:39:31
第二次的RNA提得不錯(cuò)，就是有DNA污染，用DNase處理一下就可以了。

人家要的是 DNA，。。。。貌似

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14樓2013-04-02 01:14:31

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duanepp

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可以加一些RNase處理一下，這樣就可以了

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16樓2013-04-02 08:00:59

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總體來(lái)看，第二次提的效果要遠(yuǎn)好于第一次。在提DNA 的過程中能提出那么好的RNA真的不容易，如果你要的是DNA，那就拿RNase處理。反之，那就拿Dnase處理。

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你的操作很神，提DNA竟然把RNA提的有模有樣。

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18樓2013-04-02 08:45:34

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第一張圖跑膠時(shí)間長(zhǎng)，RNA有可能會(huì)降解，但不至于降解完，不過DNA可以用。第二張圖RNA比較多，加RNAase就行了。另外做PCR時(shí)，DNA模板加50ng就足夠了，太多了反而不好！

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19樓2013-04-02 09:12:31

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3樓2013-04-01 00:39:31

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4樓2013-04-01 06:19:04

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因?yàn)椴淮_定自己提DAN有沒有提出來(lái) 泡個(gè)電泳就能確定自己有沒有提出來(lái)的啦 RNA酶有考慮加的但是實(shí)驗(yàn)室人說(shuō)加也沒什么影響的啊所以就沒加的

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6樓2013-04-01 12:27:10

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引用回帖:

4樓: Originally posted by jjg0912 at 2013-04-01 06:19:04
總體來(lái)看，第二次提的效果要遠(yuǎn)好于第一次。在提DNA 的過程中能提出那么好的RNA真的不容易，如果你要的是DNA，那就拿RNase處理。反之，那就拿Dnase處理。

其實(shí)我這是一次提的只是兩次跑電泳的第一張膠圖是第二次跑電泳的結(jié)果第二章是第一次跑的電泳圖第一次跑電泳忘記幾下序號(hào)了的所以又跑了一次結(jié)果相差很大的啊很費(fèi)解的呢

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7樓2013-04-01 12:29:35

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2樓: Originally posted by jk_xdx at 2013-03-31 22:36:41
你后來(lái)提的那個(gè)RNA比較多啊……
第一次提的也有，不過比較少。
建議DNaseI處理下。

其實(shí)兩張圖的DNA都是一次提的只是我忘記記下序號(hào) 又跑了一次的

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8樓2013-04-01 12:30:47

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3樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-01 00:39:31
第二次的RNA提得不錯(cuò)，就是有DNA污染，用DNase處理一下就可以了。

看來(lái)還是用用RNA酶處理的啊呵呵

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9樓2013-04-01 12:31:26

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