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alice鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
重疊PCR引物，兩個片段分別回收后存在雜帶是怎么回事
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如題，我設(shè)計了重疊PCR的引物，在分別PCR兩個片段后，膠回收，PCR產(chǎn)物沒有或只有少量雜帶，可是膠回收后雜帶更明顯，也不一定是PCR產(chǎn)物中存在的雜帶，哪位同學(xué)知道是怎么回事？？？ PS:已經(jīng)重復(fù)做過好多次，結(jié)果都是一樣的，求解釋和解決的辦法�。。� |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
alice: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝，我PCR的結(jié)果是對的，甚至沒有雜帶，只是膠回收之后會出現(xiàn)雜帶！ 2013-04-02 14:44:53
wizardfan: 金幣+2, 鼓勵新蟲發(fā)帖 2013-04-03 08:02:43
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
alice: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝，我PCR的結(jié)果是對的，甚至沒有雜帶，只是膠回收之后會出現(xiàn)雜帶！ 2013-04-02 14:44:53
wizardfan: 金幣+2, 鼓勵新蟲發(fā)帖 2013-04-03 08:02:43
| PCR產(chǎn)物不是目的條帶就不要回收了，要不然回收了也是錯的。另外如果PCR的結(jié)果拖尾比較厲害，那在膠回收的時候盡量吧拖尾的部分切掉，要不然膠回收驗證的時候這種現(xiàn)象會更厲害。如果PCR無目的條帶，那可能是引物或模板有問題。 |
3樓2013-04-02 14:13:03
alice
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5樓2013-04-03 23:11:27
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