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lee_炎新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助,質(zhì)粒電轉(zhuǎn)染相關(guān)問(wèn)題。
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最近做電轉(zhuǎn)染,將GFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中。結(jié)果發(fā)現(xiàn)將電擊后的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到孔板上后,細(xì)胞都死掉了。也許這是電壓高的原因,但我在做的過(guò)程中有些步驟有很大問(wèn)題,希望大家能提點(diǎn)建議或意見(jiàn)。 比如:電擊后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到孔板的時(shí)候,由于用的是0.2cm的電擊杯,所以無(wú)法將里面的細(xì)胞完全吸出來(lái),這也就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損失,我想這一步會(huì)不會(huì)損失很多細(xì)胞呢,請(qǐng)問(wèn)大家都是用什么方法轉(zhuǎn)移的呢? 另外,在將細(xì)胞離心沉淀,然后離心,清洗再離心的這一步,大家是如何做才能讓細(xì)胞的損失降到最低呢? 實(shí)驗(yàn)不順利,好糾結(jié)啊。。。 |
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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