 |
 |
 |
| 24小時熱門版塊排行榜 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1571 | 回復(fù): 2 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
[求助]
PET-22b原核表達(dá)載體構(gòu)建
|
||
|
本人才本科生超級菜鳥剛剛開始做原核表達(dá)，正在用PET-22b構(gòu)建表達(dá)載體，基因整合在Puc-57質(zhì)粒上。目的基因兩端分別有HindIII和EcoRI酶切位點一共450bp左右，質(zhì)粒是用magen公司的試劑盒提取的，PET-22b提的效果不理想，估算我酶切后的質(zhì)粒濃度超不過20ng/μl，基因小于10ng/μl。 酶切體系：（takara的酶） 連接體系（NEB的T4 DNA Ligase） 10x M buffer 2ul 10x buffer 2ul 水 6ul 水 2ul 質(zhì)粒 10ul 基因 10ul HindIII 1ul 載體 5ul EcoRI 1ul 酶 1ul 酶切37℃ 3h 連接16℃2小時（我估算基因與載體摩爾比10:1） 實驗室暫且沒有BL21就先轉(zhuǎn)化DH5α了，陽性對照轉(zhuǎn)成了，實驗組一直沒成功，求大神改進酶切、連接體系的指導(dǎo)。（本人超級菜頭一次提問求大神們別笑話） |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有148人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- pET-22b構(gòu)建好了質(zhì)粒，表達(dá)不出來？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 原核表達(dá)載體蛋白誘導(dǎo)
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 原核表達(dá)和SDS-PAGE
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 原核表達(dá)載體的構(gòu)建
已經(jīng)有37人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白變小
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 蛋白激酶原核表達(dá)
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 真核表達(dá)載體 原核 區(qū)別與擴增
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 原核表達(dá) pET32a和pET30a Western blot問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 原核表達(dá)形成了包涵體怎么辦��？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 兩個基因融合構(gòu)建真核表達(dá)載體需要去掉信號肽嗎?
已經(jīng)有7人回復(fù)
- pET-28a原核不能表達(dá)目的蛋白
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 原核表達(dá) PET-30載體 目的蛋白分子量偏��？
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 原核表達(dá)問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】酵母表達(dá)和原核表達(dá)，在技術(shù)上有什么不同？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】連接表達(dá)載體PET-28A失敗原因
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)載體pGEX-4T-1對應(yīng)的表達(dá)菌株
已經(jīng)有6人回復(fù)
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 1662 (講師)
- 金幣: 8693.8
- 紅花: 72
- 帖子: 3516
- 在線: 456小時
- 蟲號: 1614001
- 注冊: 2012-02-13
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2013-05-12 22:56:46
haitian0625
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 1392.4
- 帖子: 123
- 在線: 56.9小時
- 蟲號: 903890
- 注冊: 2009-11-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
2樓2013-05-12 19:50:43
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分，求調(diào)劑 +5 | 0857求調(diào)劑. 2026-03-24 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩，一志愿湖南大學(xué)，初試成績338 +6 | YYYYYNNNNN 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 食品工程專碩一志愿中海洋309求調(diào)劑 +4 | 小張zxy張 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
[考研]
 一志愿廈門大學(xué)化學(xué)學(xué)碩307求調(diào)劑
+10
|
y7czhao 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0856，材料與化工321分求調(diào)劑 +12 | 大饞小子 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 277跪求調(diào)劑 +5 | 1915668 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +14 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-25 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +7 | 嗯滴的基本都 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | jhx777 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +4 | AZMK 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +9 | vv迷 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調(diào)劑 +4 | 睡個好覺_16 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +5 | 哇盧卡庫 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑推薦 +5 | 清酒714 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +17 | 碩星赴 2026-03-23 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 334分 一志愿武理 材料求調(diào)劑 +4 | 李李不服輸 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 李李不服輸 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 080500求調(diào)劑 +3 | zzzzfan 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601） +5 | WW.' 2026-03-23 | 7/350 |
|