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chaojiangtao銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
DNA降解是否會提高DNA濃度呢?求解(請參考我的實(shí)驗(yàn)情況)
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第一階段: 今天做凝膠回收,用TianGen瓊脂糖凝膠回收試劑盒,按照說明進(jìn)行了操作。 最后用洗脫緩沖液EB洗脫的時候,腦子一抽,EB加多了,加了80ul. 用分光度計(jì)測其濃度多數(shù)都在3ng/ul, OD260/OD280均在1.0左右徘徊(與說明書上的1.7~1.9之間差別比較大)。 懷著僥幸的心理,跑下電泳,看能否出來想要的條帶,16個樣品,只看到了2條弱弱的目的條帶。傷心! 第二階段: 有同事建議,可以對樣品用真空離心烘干機(jī)蒸發(fā)一下洗脫緩沖液EB,提高下濃度,或許就可以了。 聽了建議,讓1.5ml離心管放入真空離心烘干機(jī)中(條件30度以下,低速旋轉(zhuǎn)),烘干了2個小時,剩下的液體樣品,用分光光度計(jì)測了一下,濃度多數(shù)都在120ng/ul. OD260/OD280的比值,也上升到1.5左右,雖然與說明書的有差別,但還能接受。為了驗(yàn)證是否有目的條帶,就跑了一板電泳,懵了,啥條帶也沒有。 這是咋回事呢?求解 情況介紹1: 樣品烘干前液體體積與烘干后液體體積的比值為4:1。濃度提升的比例達(dá)到了40倍,有點(diǎn)不可思議。懷疑,但又不敢確定。 哪位同學(xué)碰到這種情況了,幫忙解釋下,拜謝了! |

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金蟲 (小有名氣)
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