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chaojiangtao銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
DNA降解是否會(huì)提高DNA濃度呢？求解（請(qǐng)參考我的實(shí)驗(yàn)情況）
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第一階段： 今天做凝膠回收，用TianGen瓊脂糖凝膠回收試劑盒，按照說(shuō)明進(jìn)行了操作。 最后用洗脫緩沖液EB洗脫的時(shí)候，腦子一抽，EB加多了，加了80ul. 用分光度計(jì)測(cè)其濃度多數(shù)都在3ng/ul, OD260/OD280均在1.0左右徘徊（與說(shuō)明書上的1.7~1.9之間差別比較大）。 懷著僥幸的心理，跑下電泳，看能否出來(lái)想要的條帶，16個(gè)樣品，只看到了2條弱弱的目的條帶。傷心！ 第二階段： 有同事建議，可以對(duì)樣品用真空離心烘干機(jī)蒸發(fā)一下洗脫緩沖液EB，提高下濃度，或許就可以了。 聽了建議，讓1.5ml離心管放入真空離心烘干機(jī)中（條件30度以下，低速旋轉(zhuǎn)），烘干了2個(gè)小時(shí)，剩下的液體樣品，用分光光度計(jì)測(cè)了一下，濃度多數(shù)都在120ng/ul. OD260/OD280的比值，也上升到1.5左右，雖然與說(shuō)明書的有差別，但還能接受。為了驗(yàn)證是否有目的條帶，就跑了一板電泳，懵了，啥條帶也沒有。 這是咋回事呢？求解 情況介紹1： 樣品烘干前液體體積與烘干后液體體積的比值為4:1。濃度提升的比例達(dá)到了40倍，有點(diǎn)不可思議。懷疑，但又不敢確定。 哪位同學(xué)碰到這種情況了，幫忙解釋下，拜謝了！！ |
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