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119904386鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
16s引物擴增大腸桿菌，產物不是1500，而是在700上下各有一條帶
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用的是這對引物： 16s-F：5-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 16s-R：5-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3 開始是因為拿這對引物擴增芽孢桿菌得不到目的條帶，直接做的菌液PCR，未煮沸也沒提取DNA。于是就懷疑芽孢菌是不是形成芽孢后95度預變性破壞不了菌體（預變性10min還是不行），無法釋放出DNA模板。所以，想拿G-菌（大腸桿菌）做個對照。奇怪的是，大腸桿菌的擴增產物并不是1.5kb，而是在marker 700bp上下各有一條帶（也許加起來1.5kb），同時芽孢菌還是沒有帶 求解 |
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2樓2013-06-10 22:52:43
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