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[求助]
PCR問(wèn)題--求助啊 ！
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最近PCR一直出問(wèn)題，各方面排除問(wèn)題，可是還是不行，救助啊！ 圖1是之前PCR正常的，一天之隔就出不來(lái)了，圖2 2空是第一步PCR產(chǎn)物稀釋10倍的，之后分別為原液（沒(méi)稀釋），稀釋30倍，稀釋50倍，稀釋80倍，怎么都在點(diǎn)樣孔旁��！是什么原因�。。� IMG_20130516_123059.jpg IMG_20130618_155159.jpg |
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4樓2013-06-18 21:45:36
sunnyboylg
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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amisking: 金幣+2, 鼓勵(lì)發(fā)帖應(yīng)助！ 2013-06-18 20:50:58
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amisking: 金幣+2, 鼓勵(lì)發(fā)帖應(yīng)助！ 2013-06-18 20:50:58
| 看樣子是目的基因沒(méi)P出來(lái)，都是些雜質(zhì)。在添加PCR反應(yīng)體系中是否出現(xiàn)少加或者多加的問(wèn)題，樓主在重新做幾次吧，之前PCR正常說(shuō)明模板沒(méi)問(wèn)題。建議樓主也可以這樣試試：最好找一個(gè)孔，放一個(gè)肯定能P出條帶的PCR體系，當(dāng)然要同步操作，確保你的操作沒(méi)有失誤，如果這個(gè)孔能出條帶，而其他樣品不行，那么多半問(wèn)題出在你的整個(gè)PCR體系，比如模板的質(zhì)量和濃度，酶的類型和濃度，退火溫度，mg離子濃度等等。祝樓主盡早成功。。。 |
2樓2013-06-18 18:56:49
zhoulubin
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
3樓2013-06-18 20:46:21
5樓2013-06-18 21:48:29
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