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yesali木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
Real-time PCR溶解曲線Tm值,是不是在不同的儀器上做出來(lái)的不一樣?
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最近在做qPCR,引物是按照國(guó)外文獻(xiàn)提供的序列合成的,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物的溶解曲線是單一的峰,但是Tm分國(guó)外文獻(xiàn)不一樣,有的相差接近5攝氏度(文獻(xiàn)表明53.35,而我自己做的是81.69)。 請(qǐng)問(wèn)各位,Tm值會(huì)不會(huì)受不同儀器、不同試劑的影響?變化幅度在什么范圍內(nèi)能夠接受,謝謝! |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
| Tm是和產(chǎn)物直接相關(guān)的,應(yīng)該不會(huì)與儀器相關(guān),但可能與不同qPCR的盒子有一點(diǎn)點(diǎn)關(guān)系,即使不同也是非常小的差別。 |
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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