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透析袋濃縮蛋白出現(xiàn)沉淀
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| 用鎳柱進(jìn)行純化后，由于樣品的體積太大，就用PEG8000對(duì)蛋白進(jìn)行了濃縮，可是發(fā)現(xiàn)濃縮時(shí)出現(xiàn)了沉淀，透析袋的截留分子量為14000D，為什么會(huì)出現(xiàn)沉淀呢？沉淀蛋白的會(huì)不會(huì)變性？重新稀釋蛋白還可以再用嗎？PEG8000會(huì)不會(huì)進(jìn)入透析袋內(nèi)�。� |
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gaojuan1985
新蟲 (正式寫手)
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你用PEG8000.而透析袋是14000，肯定有部分PEG能進(jìn)去��！應(yīng)該選用小的透析袋，如3000的。 出現(xiàn)沉淀未必就是你的目的蛋白，最好離心之后上清和沉淀分別跑膠看一下。 你鎳柱之后應(yīng)該先徹底把咪唑透析了再做其它處理，有咪唑在，特別容易出現(xiàn)絮凝。 |
2樓2013-06-24 07:57:26
3樓2013-06-24 11:28:14
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