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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 很奇怪的酶切連接問題
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很奇怪的酶切連接問題
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| 我分別雙酶切表達載體和T-載體，再分別回收目的片段（16000bp和1100bp），在連接熱擊轉化，挑取單克隆，pcr驗證，挑陽性測序，測序結果正確（因為表達載體沒有通用引物，所以就用的自己的目的片段的引物測序，據(jù)師兄說這樣測序開頭和結尾是不準確的，中間的序列才有說服力，測序的結果表明中間的序列確實是我目的片段上的序列，因此我覺得我連接成功了，這樣理解不知對不對？），可奇怪的是：我再雙酶切重組質粒時卻切不下來了，試了好幾次，也試著改變酶切體系，可還是不行，沒有目的條帶，只有質粒一條帶，求解。。。。。。。。 |
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3樓2013-06-30 21:01:26
bleach060452
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2樓2013-06-30 14:54:05
flyy1986
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4樓2013-06-30 23:26:52
zhlf1989513
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5樓2013-07-01 08:00:18
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