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[求助]
很奇怪的酶切連接問(wèn)題
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| 我分別雙酶切表達(dá)載體和T-載體，再分別回收目的片段（16000bp和1100bp），在連接熱擊轉(zhuǎn)化，挑取單克隆，pcr驗(yàn)證，挑陽(yáng)性測(cè)序，測(cè)序結(jié)果正確（因?yàn)楸磉_(dá)載體沒(méi)有通用引物，所以就用的自己的目的片段的引物測(cè)序，據(jù)師兄說(shuō)這樣測(cè)序開(kāi)頭和結(jié)尾是不準(zhǔn)確的，中間的序列才有說(shuō)服力，測(cè)序的結(jié)果表明中間的序列確實(shí)是我目的片段上的序列，因此我覺(jué)得我連接成功了，這樣理解不知對(duì)不對(duì)？），可奇怪的是：我再雙酶切重組質(zhì)粒時(shí)卻切不下來(lái)了，試了好幾次，也試著改變酶切體系，可還是不行，沒(méi)有目的條帶，只有質(zhì)粒一條帶，求解。。。。。。。。 |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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lwiaanngg
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myprayer: 金幣-1, 應(yīng)助指數(shù)-1, 與應(yīng)助無(wú)關(guān)的內(nèi)容，請(qǐng)勿點(diǎn)擊應(yīng)助按鈕，否則一律視為刷應(yīng)助指數(shù)。分子生物期待你的積極交流 2013-07-01 11:23:04
33ggdf(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 再三斟酌，此貼回復(fù)還是缺少一點(diǎn)實(shí)質(zhì)性的東西，zhlf1989513能補(bǔ)充相關(guān)的應(yīng)助信息則最好不過(guò)了，分子生物版塊期待你的積極交流 2013-07-01 11:25:47
myprayer: 金幣-1, 應(yīng)助指數(shù)-1, 與應(yīng)助無(wú)關(guān)的內(nèi)容，請(qǐng)勿點(diǎn)擊應(yīng)助按鈕，否則一律視為刷應(yīng)助指數(shù)。分子生物期待你的積極交流 2013-07-01 11:23:04
33ggdf(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 再三斟酌，此貼回復(fù)還是缺少一點(diǎn)實(shí)質(zhì)性的東西，zhlf1989513能補(bǔ)充相關(guān)的應(yīng)助信息則最好不過(guò)了，分子生物版塊期待你的積極交流 2013-07-01 11:25:47
| 這個(gè)問(wèn)題我也遇見(jiàn)過(guò)，不知道樓主解決否？可否討教下~~~ |
5樓2013-07-01 08:00:18
ivyvampire
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