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[求助]
很奇怪的酶切連接問題
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| 我分別雙酶切表達(dá)載體和T-載體，再分別回收目的片段（16000bp和1100bp），在連接熱擊轉(zhuǎn)化，挑取單克隆，pcr驗(yàn)證，挑陽性測序，測序結(jié)果正確（因?yàn)楸磉_(dá)載體沒有通用引物，所以就用的自己的目的片段的引物測序，據(jù)師兄說這樣測序開頭和結(jié)尾是不準(zhǔn)確的，中間的序列才有說服力，測序的結(jié)果表明中間的序列確實(shí)是我目的片段上的序列，因此我覺得我連接成功了，這樣理解不知對不對？），可奇怪的是：我再雙酶切重組質(zhì)粒時(shí)卻切不下來了，試了好幾次，也試著改變酶切體系，可還是不行，沒有目的條帶，只有質(zhì)粒一條帶，求解。。。。。。。。 |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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9樓2013-07-04 10:32:23
bleach060452
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2樓2013-06-30 14:54:05
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flyy1986
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4樓2013-06-30 23:26:52
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