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xinting0627鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
定量PCR模板濃度問題 已有1人參與
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我做的定量PCR,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的內(nèi)參GAPDH的cq值在18-20左右。但是目的基因就是30多。請(qǐng)問 1、這樣的話表達(dá)結(jié)果可靠嗎? 2、如果我將內(nèi)參的模板濃度稀釋,將目的基因的模板濃度加倍,使得兩個(gè)基因的cq值相差不大。這樣的結(jié)果可靠嗎? 懇請(qǐng)高手解答,謝謝。 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
| 結(jié)果是否可靠要看你做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)候的線性范圍。CT值一般在15-30的時(shí)候比較好,做標(biāo)準(zhǔn)曲線的時(shí)候一般也是在這個(gè)范圍。如果內(nèi)參和目的基因的CT相差實(shí)在太大,可以按照你說的稀釋內(nèi)參模板,增加目的基因的模板來P。 |
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