 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 716 | 回復(fù): 2 | ||
hwchen2000金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
|
[求助]
單條3-race通用引物擴(kuò)增出5-6個(gè)條帶，有沒(méi)有
|
|
各位大俠，最近在做PCR，本來(lái)是想做3-race的，沒(méi)做出來(lái)，后來(lái)受壇子里的一個(gè)蟲(chóng)友啟發(fā)，只用巢式引物和3-通用引物擴(kuò)增出6個(gè)條帶，結(jié)果測(cè)序結(jié)果回來(lái)不可思議，上游引物居然就是3-通用引物的互補(bǔ)序列，下游引物就是3-通用引物，后來(lái)用3-通用引物做單引物擴(kuò)增，這6個(gè)條帶居然全擴(kuò)出來(lái)，真是奇葩了，有沒(méi)有筒子能解釋一下啊 3-通用引物5'-GCTGTCAACGATACGCTACGTAACGGCATGACAGTG (T)18-3' |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有223人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 求3‘RACE引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- dgge最后一次分離切膠后用不帶GC夾子引物擴(kuò)增不出目的條帶
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 3‘RACE出現(xiàn)了單引物擴(kuò)增
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 求助，關(guān)于pcr擴(kuò)增后產(chǎn)物序列在ncbi上的比對(duì)，以及3' race接頭引物的設(shè)計(jì)。。
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 求助：PCR擴(kuò)增片段測(cè)序結(jié)果引物中間多出150bp的片段
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 高氏一號(hào)分離的菌用16S通用引物擴(kuò)增不出條帶
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 3’RACE擴(kuò)增技術(shù)
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 反向PCR之單引物擴(kuò)增，真悲劇
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 通用引物擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 請(qǐng)問(wèn)AFLP的選擇性擴(kuò)增引物的第一個(gè)選擇性堿基為什么是A和C
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 如何設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增目的基因的ORF？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 16s rDNA 擴(kuò)增引物的選擇
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】有引物二聚體、非特異性擴(kuò)增帶是怎么回事？
已經(jīng)有10人回復(fù)
bullfrog325
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 193 (高中生)
- 金幣: 2880.3
- 散金: 200
- 紅花: 24
- 帖子: 744
- 在線: 269.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1864929
- 注冊(cè): 2012-06-20
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-07-20 21:46:21
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-07-20 21:46:21
|
巢式PCR第一輪的時(shí)候如果有非特異的引物/模板結(jié)合, 這種PCR產(chǎn)物就會(huì)在第二輪繼續(xù)被擴(kuò)增. 樓主的第一輪巢式PCR溫度太低了. 通用引物里面的poly-T和模板末端的poly-A(對(duì)應(yīng)原來(lái)mRNA的poly-A)這種結(jié)合是你希望發(fā)生的, 但是如果有某個(gè)cDNA中間也有和poly-A相似序列, 你的通用引物也可以勉強(qiáng)集合上, 只要這個(gè)發(fā)生就會(huì)給下面的PCR提供模板. |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
hwchen20002樓2013-07-20 18:43:42
hwchen2000
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1950.5
- 帖子: 444
- 在線: 89.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 216162
- 注冊(cè): 2006-03-11
- 專業(yè): 生物化學(xué)與分子生物學(xué)
3樓2013-07-22 10:33:57
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 hwchen2000 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 +7 | A-哆啦Z夢(mèng) 2026-03-23 | 12/600 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +11 | hanamiko 2026-03-18 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩0703總分337求調(diào)劑 +5 | niko- 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +4 | 收到VS 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 070300，一志愿北航320求調(diào)劑 +3 | Jerry0216 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)071000，求調(diào)劑 +4 | 沿岸有貝殼6 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 初試 317 +7 | 半拉月丙 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 一志愿東華大學(xué)控制學(xué)碩320求調(diào)劑
+3
|
Grand777 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +11 | 戲精丹丹丹 2026-03-17 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 南昌大學(xué)材料專碩311分求調(diào)劑 +6 | 77chaselx 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑 +12 | yangfz 2026-03-17 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +4 | ydfyh 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境專碩，總分308求調(diào)劑 +3 | 墨墨漠 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +9 | 想上學(xué)吖吖 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ^O^乜 2026-03-19 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿南京航空航天大學(xué)289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +5 | pupcoco 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 收復(fù)試調(diào)劑生 +4 | 雨后秋荷 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 26博士申請(qǐng) +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|